药(肠)

Epi肠是一个高度分化的3D组织模型,它紧密地概括了生理机能, 组织结构, 以及小肠上皮的功能. 由正常的人类细胞产生, Epi肠在药物开发中的应用包括药物吸收和代谢的预测.

该模型

Epi肠组织模型是在空气-液体界面(ALI)上在易于操作的组织培养插入物和96孔高通量筛选板中生成的. 肠外组织模型表现为柱状, 增生性基底细胞(包括LGR5+成体干细胞), Paneth细胞, M细胞和肠上皮细胞,以及外排转运蛋白的表达和活性. Epi肠的结构分析证实了极化上皮具有绒毛结构和Kerckring褶皱. 超微结构的, 肠外展刷状边缘, 功能性紧密连接和黏液分泌颗粒, 与体内组织相似的.

Epi肠网站

图1

超微结构分析:透射电子显微图 A) 在体外 Epi肠和 B)外植体组织显示Brush边界(位于肠细胞管腔极)和紧密连接. Brush border provides digestive 和 absorption surface; site for enzymes & 转运蛋白.

药物传递Char 2a

描述:截面显微图像 A表肠(仅上皮细胞)标记CK19(红色, 上皮细胞标记物)和绒毛蛋白(绿色, 刷边界标记)和 Bepitestinalft(含成纤维细胞的全层组织)标记为Vimentin(绿色, 成纤维细胞标志物)和CK19(红色).

的方法

Epi肠以10 μ M浓度暴露于10个利用特异性药物转运体的模型药物2小时. 采用LC-MS/MS分析被试化合物的药物摄取和外排转运. 组织完整性和屏障功能的监测采用跨上皮电阻(TEER)和Lucifer Yellow泄漏. 表观渗透系数(Papp)在肠外组织模型中确定,并与先前报道的人体吸收进行比较.

结果

Epi肠分析显示: 1) 表达CK19和villin的柱状上皮细胞, 2) 上皮标志物和外排转运蛋白的表达 (图1), 3) 高重复性,生理TEER值为110-150 Ω*cm2 (表1)4) 刷边界. 使用10种模型药物的研究显示出较强的相关性(R2 = 0.8)与人类吸收的历史值相比,药物在肠外组织的渗透 (图2、表2). Epi肠 demonstrated active drug transport (for drugs with efflux ratios >2 fold) which was significantly modulated by inhibitors of the efflux drug 转运蛋白 (表3). 此外, 与人类吸收的历史价值相比, 与Epi肠的相关性更强(R2 = 0.Caco-2 (R2 = 0.81)用于低渗透性药物 (图3).

图1 (1)

DD图2

表3

DD图3

有关详细信息,请查看 Epi肠技术页面, 技术的引用.